V decembri 2019 sa z Wu -chanu, provincia Chu -pej, začala séria prípadov zápalu pľúc neznámej príčiny sa čoskoro rozšírilo do väčšiny provincií a miest v Číne a mnohých ďalších krajinách v januári 2020. O 22:00 hod 27. januára bolo v Číne hlásených 28 potvrdených prípadov a 5794 podozrivých z prípadov 2019-nCov. Thezdroj infekcie vírusu bol odvodený ako Rhinolophus a súčasná úmrtnosť je 2,9%.
Svetová zdravotnícka organizácia (WHO) 12. januára 2020 oznámila, že epidémiu zápalu pľúc spôsobil nový typ koronavírusu (2019-nCov). Koronavírus je druh vírusu, ktorý sa šíri medzi zvieratami. Typ nukleovej kyseliny vírusu je jednovláknová RNA. WHO súčasne zverejnila aj informácie o sekvencii nukleových kyselín nCov zdieľané čínskymi vedcami, ktoré poskytli základ molekulárnej detekcie na detekciu vírusov a umožnili rýchlu detekciu a identifikáciu patogénov.
WHO navrhuje, aby ľudia, ktorí majú akútne respiračné ochorenia ako je kašeľ, horúčka, infekcia dýchacích ciest a boli vo Wu -chane do 14 dní alebo boli vystavení kontaktu s inými pacientmi, boli podrobení komplexnému vyšetreniu. 17. januára 2020 vydala WHO „Laboratórne testovanie nového koronavírusu 2019 (2019-nCoV) v podozrivých prípadoch u ľudí, predbežné usmernenie 17. januára 2020“. Pokyny uvádzajú, že vzorky, ktoré sa majú odobrať od symptomatických pacientov, zahrnujú respiračné vzorky (výtery z nosohltanu a orofaryngu, spútum, bronchoalveolárny výplach atď.) A vzorky séra:
*Na prepravu vzoriek na detekciu vírusov použite VTM (vírusové transportné médium) obsahujúce antimykotické a antibiotické doplnky. V prípade kultivácie baktérií alebo húb prepravujte suché alebo vo veľmi malom množstve sterilnej vody. Vyhnite sa opakovanému zmrazovaniu a rozmrazovaniu vzoriek.
Okrem konkrétnych zberných materiálov uvedených v tabuľke sa uistite, že sú k dispozícii aj ďalšie materiály a vybavenie: napr. Prepravné nádoby a vrecká a obaly na zber vzoriek, chladiče a chladiace obaly alebo suchý ľad, sterilné zariadenia na odber krvi (napr. Ihly, striekačky a skúmavky), štítky a trvalé značkovače, OOP, materiály na dekontamináciu povrchov.
Na detekciu vírusov je možné použiť vzorky séra na detekciu vírusu imunologickou metódou, zatiaľ čo RTqPCR sa odporúča na detekciu nukleovej kyseliny nCov na rýchlejšie a presnejšie zistenie. Ako vírus
sekvencia je známa, obsah vírusovej nukleovej kyseliny vo vzorke je možné rýchlo zistiť iba
výber vhodných reagencií a zodpovedajúcich primerov
(Diagnostická detekcia wuhanského koronavírusu 2019 pomocou RTPCR v reálnom čase, protokol a predbežné vyhodnotenie k 13. januáru 2020) Ako líder v oblasti extrakcie a detekcie nukleových kyselín v Číne spoločnosť TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD. poskytla viac ako 10 miliónom ľudí detekčné činidlá proti vírusu ruky a nohy a chrípke A (H1N1). V roku 2019 boli extrakčné a detekčné činidlá na detekciu nukleových kyselín vírusu TIANGEN aplikované na 30 miliónov vzoriek afrického klasického moru ošípaných, čo predstavuje významný prínos k diagnostike a prevencii afrického klasického moru ošípaných v Číne. TIANGEN poskytuje nielen rýchle a presné činidlá na extrakciu a detekciu vírusov, ale poskytuje aj pohodlné a efektívne nástroje na brúsenie tkanív a automatické extraktory nukleových kyselín, ktoré predstavujú kompletný súbor riešení na extrakciu a detekciu vírusov.
Automatický roztok na extrakciu nukleovej kyseliny
Automatizované extraktory nukleových kyselín TIANGEN sú automatické platformy na extrakciu nukleových kyselín metódou magnetických guľôčok. Aplikácia týchto platforiem nielenže výrazne znižuje pracovné zaťaženie inšpekčných a karanténnych oddelení, ale tiež znižuje prevádzkové chyby ručnej extrakcie a zaisťuje konzistenciu a stabilitu kvality extrahovanej nukleovej kyseliny.
Automatický extraktor nukleovej kyseliny TIANGEN má rôzne priepustnosti (vrátane 16, 24, 32, 48, 96 kanálov) a zodpovedajúce činidlá je možné použiť na extrakciu nukleovej kyseliny z rôznych typov vzoriek. TIANGEN tiež poskytuje prispôsobené služby pre vývoj reagencií a integráciu nástrojov podľa rôznych experimentálnych požiadaviek.
TGrinder H24 tkanivový homogenizátor
● Široko používané na mletie a homogenizáciu rôznych vzoriek tkanív a výkalov
● S homogenizačnou silou brúsenia 2 až 5-krát vyššou ako u tradičných nástrojov
● Rovnomerné mletie a homogenizácia, zabránenie krížovej kontaminácii
● Automatické ochranné zariadenie na ochranu bezpečnosti laboratórneho personálu
Automatický extraktor nukleovej kyseliny TGuide S32
● Prepustnosť vzorky: 1-32 vzoriek
● Objem spracovania: 20-1000 μl
● Typ vzorky: Krv, bunky, tkanivá, výkaly, vírusy a ďalšie vzorky
● Čas spracovania: Až 8 minút na získanie vírusovej nukleovej kyseliny
● Režim ovládania: Režim dvojitého ovládania Windows Pad a tlačidla obrazovky
● Vývoj platformy: Otvorená platforma, voľne priraditeľné činidlá
● Súprava magnetickej vírusovej DNA/RNA TGuide S32 (DP604)
● Široké použitie: DNA/RNA vírusu vysokej kvality je možné purifikovať zo séra, plazmy, vzorky tampónu, roztoku na ošetrenie tkaniva a rôznych roztokov na konzerváciu vírusov.
● Jednoduché a efektívne: Tento produkt je perfektne zladený s automatickým extraktorom nukleovej kyseliny TGuide S32, ktorý dokáže extrahovať vírusovú DNA/RNA s vysokým výťažkom, vysokou čistotou, stabilnou a spoľahlivou kvalitou.
● Nasledujúce aplikácie: Purifikovaná nukleová kyselina je vhodná pre následné experimenty s vírusovou PCR a PCR v reálnom čase.
Manuálny roztok na extrakciu nukleovej kyseliny
Ako líder v oblasti extrakcie a detekcie nukleových kyselín má TIANGEN v Číne najkomplexnejšiu sériu produktov na extrakciu nukleových kyselín, ktoré sú ideálne na detekciu koronavírusu zo všetkých druhov vzoriek: krv, sérum/plazma, tkanivo, tampón, vírus , atď.
Súprava DNA/RNA vírusu TIANamp (DP315)
● Vysoká účinnosť: DNA a RNA vírusu vysokej kvality je možné získať rýchlou purifikáciou s vysokou opakovateľnosťou.
● Vysoká čistota: Úplné odstránenie znečisťujúcich látok a inhibítorov pre následnú aplikáciu.
● Vysoká bezpečnosť: Extrakcia organickými činidlami alebo zrážanie etanolom nie sú potrebné.
Riešenie na detekciu vírusov RNA
1. Automatický pipetovací systém TEasy
● Vysoká presnosť: Chladiaci blok môže udržiavať teplotu vzorky činidla pod 7 ° C viac ako 60 minút. Každý APM je kalibrovaný podľa medzinárodných štandardov, ktoré majú vyššiu presnosť ako ručné pipetovanie.
● Jednoduché ovládanie: Malé rozmery. Nízka hmotnosť. Na výmenu blokov nie je potrebný žiadny nástroj. Vstavaný postup prípravy PCR/qPCR. Zjednodušená ručná prevádzka prípravy roztoku PCR.
● Široké použitie: Možno použiť na pipetovanie 96/384-jamkových platničiek, PCR, qPCR, detekciu génov a ďalšie vysokovýkonné experimenty.
Jednokroková súprava FastKing RT-qPCR (sonda) (FP314)
Súprava FastKing One Step RT-qPCR (sonda) (FP314) vyvinutá spoločnosťou TIANGEN je súprava kvantitatívnej detekcie fluorescencie s reverznou transkripciou založená na metóde sondy, ktorá je špeciálne navrhnutá na detekciu stopových génov v rôznych vzorkách. KingRTase v súprave je nová molekulárne modifikovaná reverzná transkriptáza, ktorá má silnejšiu afinitu k RNA a tepelnú stabilitu, so zlepšenou účinnosťou reverznej transkripcie a možnosťou rozšírenia komplexných templátov sekundárnej štruktúry RNA. Na zaistenie vyššej účinnosti a špecifickosti reakcie PCR je tiež použitá nová Taq DNA polymeráza s horúcim štartom. Súprava navyše v najväčšej miere zjednodušuje komponenty zmiešaním enzýmu Taq a MLV do zmesi enzýmov a predbežným zmiešaním iónového pufra, dNTP, stabilizátora PCR a zosilňovača do MasterMix, aby bolo možné vykonať viaczložkové kroky miešania.
zjednodušené.
● Vysoká účinnosť: Vynikajúca reverzná transkriptáza a DNA polymeráza zaisťujú vysokú účinnosť reakcie
● Dobrá reverzibilita: Polymeráza môže čítať cez templát RNA s vysokým obsahom GC a komplexnou sekundárnou štruktúrou
● Široké aplikácie: Vysoká použiteľnosť na templáty RNA s nečistotami z rôznych druhov
● Vysoká citlivosť: Šablóny už od 1 ng je možné presne identifikovať, najmä pre šablóny s nízkym výskytom
Príklad detekcie vírusov RNA
Nukleová kyselina vtáčej chrípky H5 bola extrahovaná súpravou TGuide S32 Magnetic Viral DNA/RNA Kit (DP604). Jednokroková súprava RT-qPCR FastKing (sonda) (FP314) sa použila na detekciu RT-qPCR pomocou špecifických primerov a sond vtáčej chrípky H5.
Na detekciu RT-qPCR bol použitý ABi7500Fast. Výsledky antigénu vírusu vtáčej chrípky H5 (riedenie 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 a 10-7) zo 200 µl vzoriek vykazujú vysoký výťažok extrakcie nukleovej kyseliny vírusu, ktorý môže spĺňať nasledujúce potreby reverznej transkripcie, PCR, RT-PCR, PCR v reálnom čase atď. PCR v reálnom čase prináša výsledky s vysokou citlivosťou, dobrou opakovateľnosťou a dobrou linearitou zrieďovania gradientov. Presne sa dajú detegovať rôzne koncentrácie vzoriek vírusových nukleových kyselín.
Čas zverejnenia: 11. apríla 2021